導(dǎo)讀:農(nóng)藥殘留檢測儀在一定條件下,有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對膽堿酯酶正常功能有抑制作用,其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)系。正常情況下,酶催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物(乙酰膽堿)水解,其水解產(chǎn)物顯色劑反應(yīng),產(chǎn)生黃色物質(zhì),用農(nóng)藥殘留檢測儀器測定吸光度隨時間的變化值,計算出抑制率,通過抑制率可以判斷出樣品中是否含有有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的存在。
一、溶解酶為何出現(xiàn)酶活性低現(xiàn)象?
1)運輸過程中酶已失活;
2)沒有充分搖勻;
3)配制過程中試劑、蒸餾水、移液管被污染或沒有洗凈;
4)操作不當,導(dǎo)致酶失活;
5)培養(yǎng)時間較短;
6)培養(yǎng)溫度較低;
7)配置好的試劑保存溫度過高,使酶失活
二、食品安全測試過程中需要注意哪些問題?
1)在檢測過程中反應(yīng)瓶、微量移液器、移液管等要洗干凈;特別是用完后立即清洗,放在無污染的地方晾干(如濾紙上、移液管架上等);
2)不同試劑使用不同的器具,堅持器具,并貼上標簽;
3)酶、顯色劑、底物的加入量要準確,加后要搖勻;
4)用手抓比色皿的磨砂面,放進儀器比色槽時,應(yīng)將透光面對應(yīng)光路方向,讓光路通過比色皿的透光面;
5)操作要盡量快。因為酶抑制率檢測的關(guān)鍵就是抑制率與反應(yīng)時間的關(guān)系,對照測量和樣品測量操作時間不一致,也會造成檢測結(jié)果不準確;
6)加入酶試劑以前一定要把培養(yǎng)池溫度加熱到37℃,以保證加完酶液和顯色劑后能立即把反映瓶放入培養(yǎng)池,切記不能加完試劑后再等升溫;
7)在使用移液槍吸取溶液時,按壓要適度,切忌一下按到底,并且吸頭要及時清洗。
三、農(nóng)藥殘留檢測儀其他注意事項
1.磷酸鹽緩沖液的配置一定要用蒸餾水或純凈水或礦泉水,否則影響準確性。
2.酶試劑及底物要在0~5℃溫度條件下保存,以確保酶的活性,因此,應(yīng)在冰箱中保存,但不能凍至結(jié)冰。
3.試劑從試劑瓶吸出后,不能再放回瓶中,堅持只吸不進的原則,防止試劑污染。
4.樣品測試的zui后一道程序,即加底物后,應(yīng)馬上搖勻,放入測定儀,否則影響數(shù)據(jù)準確性。經(jīng)實踐,在菠菜樣品的測試中,立刻放入的抑制率為21.4%,1分鐘后放入的51.7%,可見,加試劑后放入時間的長短可影響其準確性。
5.韭菜、芹菜、蒜、蔥及茄汁液中含有對酶有影響的植物次生物質(zhì),容易產(chǎn)生假陽性。因此.,處理這類樣品時,可采取整株蔬菜浸出提取液的方法(不要搞爛樣品)。對葉綠素含量較高的蔬菜,也可采取類似方法。
6.生化檢測法只是定性檢測法,只能檢測有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留,不適用于其它類型農(nóng)藥的檢測。